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Specialista Uomo Nike Air Max One Nero,fosfatasi alcalina AEQ è stata misurata

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La differenza nella cinetica di luce di emissione tra il Ca2 + -triggered Offerte Uomo Nike Air Max One Grigio Fluorescent Verde bioluminescente reazione della fotoproteina equorina (AEQ) e la fosfatasi alcalina (ALP) -catalyzed idrolisi chemiluminescente di substrati fosfato dioxetane arilici è stata sfruttata per l'analisi di entrambi gli alleli di polimorfismi biallelici in Specialista Uomo Nike Air Max One Nero un singola micropiastra bene. La genotipizzazione del IVS-1-110 locus del gene della beta-globina umana è stato scelto come modello. DNA genomico, isolati dal sangue intero, è stato sottoposto a reazione a catena della polimerasi con primer fiancheggianti il ​​sito polimorfico. Fu poi eseguita una singola reazione oligonucleotide-ligazione impiegando due sonde allele-specifici, marcato con biotina e digossigenina, e una sonda comune trasportano una caratteristica coda. I prodotti legatura sono stati catturati in un microtitolo bene attraverso l'ibridazione di coda con un oligonucleotide complementare immobilizzato. I prodotti sono stati rilevati aggiungendo una miscela di streptavidina-equorina complesso e antidigoxigenin-coniugato di fosfatasi alcalina. AEQ è stata misurata prima aggiungendo Ca2 + e integrando il segnale per 3 u0026 nbsp; s seguita dall'aggiunta di substrato per ALP. Il rapporto tra i segnali di luminescenza ottenuti da ALP e AEQ dà il genotipo di ciascun campione. Il coefficiente di variazione della doppia dosaggio variava da 7 a 11% per ogni allele. La riproducibilità del rapporto segnale ALP / AEQ era circa 14%. Il test proposto permette di molti campioni per essere esaminati in parallelo in un unico micropiastra, per polimorfismi a singolo nucleotide.
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